扫描电镜如何进行断层成像?
日期:2025-02-08
扫描电镜(SEM)通过断层成像可以获得样品内部的三维结构信息。这种方法通常被称为聚焦离子束扫描电镜(FIB-SEM)断层成像,或者是通过特定的软件结合多视角图像进行重建。以下是常见的实现方式和操作步骤:
1. 基于 FIB-SEM 的断层成像
原理:
FIB(聚焦离子束)用来去除样品表层的微薄层。
SEM 在每次去除后扫描样品的截面图像。
多次重复操作,获得一系列连续的二维图像。
图像经过处理和重建,生成三维结构。
具体步骤:
样品制备:
将样品安装在样品台上,通常需要镀导电层(如金或碳)以避免电荷积累。
根据研究目标,可能需要对样品进行切割或固定,以确保目标区域能够被离子束处理。
区域选择:
使用 SEM 确定需要进行断层成像的样品区域。
FIB 用来标记切割区域,定义断层成像的范围。
FIB 去除表层:
利用聚焦离子束(通常为 Ga⁺ 离子),逐层去除样品的材料,去除厚度可以在纳米量级精确控制(如 10 nm/层)。
SEM 图像采集:
每去除一层后,用 SEM 获取切面图像。
需要调节 SEM 的工作参数(如加速电压、探测器类型)以优化图像质量。
图像处理:
收集到的所有二维图像通过去噪、对齐、配准等处理。
使用专门的断层重建软件(如 Avizo、Amira 或 ImageJ 的 3D 插件)生成三维模型。
三维重建和分析:
重建后的三维模型可以用于观察样品内部结构、分析体积、测量尺寸或评估缺陷。
优点:
高分辨率:能够在纳米级分辨率下进行三维重建。
局部化:可以对样品的特定区域进行精细分析。
缺点:
破坏性:FIB 处理会损坏样品。
时间长:需要重复采集和处理图像,耗时较多。
2. 通过多视角 SEM 图像重建
原理:
对样品进行不同角度的 SEM 成像(类似 CT 成像)。
利用计算机算法将这些多视角图像重建为三维结构。
具体步骤:
样品旋转:
使用带旋转功能的样品台,从不同角度获取 SEM 图像。
每次旋转角度可精确到 1° 或更小,以确保成像的连续性。
图像采集:
对样品进行多角度 SEM 扫描,获取 2D 投影图像序列。
保持成像条件一致(如电压、工作距离、探测器设置)。
图像重建:
将采集到的多角度图像输入断层重建软件。
通过算法(如反投影算法、ART 或 FBP)计算样品的三维结构。
优点:
非破坏性:样品在成像过程中不会被损坏。
更适合轻质材料或对损伤敏感的样品。
缺点:
分辨率低于 FIB-SEM。
样品几何形状复杂时,可能会导致图像失真。
3. 基于冷冻断层的 SEM 成像
原理:
冷冻样品后,利用 SEM 和 FIB 结合的方式逐层切割和成像。
冷冻保护样品的内部结构,尤其是生物样品。
适用场景:
生物学领域(如细胞和组织结构的三维重建)。
水合样品或易受离子束损伤的材料。
断层成像应用领域:
材料科学:
分析材料的内部结构、孔隙率和分布特性。
检测材料缺陷或裂纹。
生物学:
重建细胞或组织的三维结构。
研究亚细胞器的形态和分布。
半导体行业:
分析晶体管、纳米级电路的内部结构。
检测制造过程中的缺陷或异物。
地质学:
分析岩石或矿物的微观结构。
测量孔隙度和渗透性。
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作者:威尼斯886699